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Este artículo es parte de la edición de marzo, 2016
Campylobacter: una bacteria difícil de identificar. ¿puede la innovación servir para controlarla a nivel de campo?
S. Ingresa y col.
Symp. de la AECA-WPSA. Málaga, 28/30-10-2015
Los métodos de referencia utilizados para el aislamiento de Campylobacter tienen ciertas limitaciones, como el ser muy laboriosos, requerir entre 4 y 6 días para la confirmación de un resultado positivo y no ser capaces de detectar la presencia de las formas viables pero no cultivables de la bacteria, ni la presencia de ésta en baja cantidad. En cambio, la técnica de inmunofiltración –ELIFA- permite por un lado la pre-concentración de las muestras y la detección de las formas viables no cultivables, lo que se traduce en un aumento de la sensibilidad de detección y reducción del tiempo de trabajo a nivel de laboratorio.
En este contexto, hemos realizado un estudio para investigar la dinámica de colonización de Campylobacter en la etapa de engorde del broiler, desarrollando un procedimiento alternativo de detección basado en la técnica ELIFA. Para ello se muestrearon 21 explotaciones de broilers de la Comunidad Valenciana, analizando las muestras siguiendo la Norma ISO 10272:2006-1 y de forma paralela se analizaron cultivos bacterianos puros de Campylobacter, a diferentes concentraciones y volúmenes de muestra mediante la técnica de immunofiltración, utilizando los dos modelos de ELISA directo e indirecto.
Resultados
Los resultados del estudio destacan la elevada prevalencia de Campylobacter a nivel de campo, con 20 de los 21 lotes de broilers positivos al final del engorde, aunque no se aisló la bacteria a partir de ninguna muestra de pollitos de un día. Otros estudios epidemiológicos llevados a cabo en lotes comerciales han concluido también que los pollitos de un día parecen estar libres de Campylobacter -Newell y Fearnley, 2003-. Este estatus negativo persiste hasta las dos semanas de edad de los pollitos y a partir de este momento la excreción aumenta hasta el final del engorde.
Los resultados de este estudio destacan la elevada prevalencia de Campylobacter a nivel de campo, con un 95,2% de lotes positivos al final del engorde. Los resultados preliminares del ensayo de immunofiltración mostraron que la mínima concentración de células produciendo una señal positiva fue de aproximadamente 102 UFC/ml, utilizando el modelo de ELISA directo, aumentando la sensibilidad de Campylobacter spp. con el incremento del volumen de muestra.
En los análisis de las muestras ambientales destaca que ninguna de ellas resultó positiva a la bacteria. Otros autores han demostrado que el Campylobacter no resiste en el ambiente de la granja entre dos lotes consecutivos debido a su baja resistencia a la deshidratación, aunque la bacteria puede transformarse en una forma viable pero no cultivable, bajo condiciones desfavorables o estresantes. Estas formas bacterianas pueden sobrevivir y volver al estado de cultivables cuando se les proporcionan condiciones apropiadas para su crecimiento. Una de las principales limitaciones de los métodos convencionales de cultivo para la identificación de Campylobacter es que no son capaces de detectar a este microorganismo cuando se encuentra bajo estas formas o en muy baja cantidad.
El C. jejuni, fue la especie aislada con mayor frecuencia en más del 84,0% de los individuos analizados, coincidiendo con la principal especie implicada en los brotes de gastroenteritis en humana -EFSA, 2015-. Estos resultados subrayan la importancia de la carne de pollo como principal fuente de infección de Campylobacter en humanos y destacan la complejidad del estudio de la ecología de este microorganismo, acentuando su importancia como riesgo para la salud pública. Por este motivo, la reducción o eliminación de Campylobacter del reservorio de las aves resulta esencial para poder controlar este problema de seguridad alimentaria.
La implementación de programas de control eficaces para Campylobacter a nivel de campo no puede lograrse sin un conocimiento de la epidemiología de esta bacteria en cada una de las etapas de producción de la carne de pollo. En este contexto, la técnica del ELIFA podría ser una herramienta útil y sensible para la rápida detección de Campylobacter, especialmente en muestras con poca celularidad o en las que las células estén especialmente dañadas. •
Tabla 1. Número de muestras positivas de Campylobacter aisladas durante el periodo de engorde (*)
|
Días de edad |
Muestras positivas, % (&) |
|
7 |
0,0 a |
|
14 |
4,8 b |
|
21 |
15,2 c |
|
28 |
30,9 d |
|
35 |
43,8 c |
|
42 |
61,9 f |
|
(*) Los diferentes superíndices indican diferencias estadísticamente significativas (P<0,05). |
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