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Hepatitis por cuerpos de inclusión: brote en España 2011-2012

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email: roser.dolz@cresa.uab.cat y una mortalidad que puede llegar hasta el 30 %. de genotipado que ha permitido identificar dos grupos de adenovirus involucrados en el brote. adenovirus aviares del grupo 1 -Familia Adenoviridae ; primarios. Como los virus de referencia utilizados en (Tabla 1). necrotizante multifocal de con la presencia de cuerpos En general, la IBH afecta broilers de entre 3 y 7 semanas de vida, aunque se han descrito brotes tempranos en La morbilidad es baja y la mortalidad, que causa un pico verticalmente pueden excretar virus en las heces desde semanas de vida y mortalidades del 30%. A partir de las de los serotipos 6, 7 y 8, pero todos ellos pertenecientes al genotipo E. De forma similar, en Nueva Zelanda se aislaron adenovirus de los seroti- genotipo E, pero diferentes a los aislados de Australia. 3 casos anuales -Figura 1-. Pero en la prima- y empresas integradoras. Se produjeron casos reproductoras pesadas, y se observaron casos vida (Tabla 2). de casos diagnosticados de he- patitis por cuerpos de inclu- Veterinari de la Universitat 5 casos en broilers y 2 casos en reproductoras pesadas En todos los casos se obtuvo un fragmento de unos B-1118/11; N-235/12- de los 7 virus en el genotipo D REFERENCIAA TIPO AVEVE TIPO AVEVEE EDAD EDAD EDAD B-00232-11 2011 Mar Broiler 28d Navarra B-00595-11 2011 Jun Broiler 16d Catalunya N-00259-11 2011 Jun Broiler 12d Catalunya B-00651-11 2011 Jun Broiler 19d Navarra B-00722-11 2011 Jul Catalunya N-00325-11 2011 Jul Broiler 14d B-00751-11 2011 Jul Machos reproductores 9d Navarra B-00872-11 2011 Sep Broiler Valencia B-00899-11 2011 Sep Catalunya B-00950-11 2011 Oct Broiler Valencia B-00978-11 2011 Oct Broiler 32d N-00512-11 2011 Nov Reproductora pesada 8d Catalunya B-01030-11 2011 Nov Broiler 40d Catalunya B-01049-11 2011 Nov Broiler Catalunya B-01118-11 2011 Nov Broiler 14d Castilla la Mancha B-01141-11 2011 Dic Broiler 14d Galicia B-01171-11 2011 Dic Broiler 7d Galicia B-00019-12 2012 Ene Machos reproductores B-00074-12 2012 Ene Broiler 22d Catalunya B-00097-12 2012 Ene Broiler 18d B-00202-12 2012 Feb Broiler 4d Catalunya B-00235-12 2012 Mar Broiler 25d Catalunya B-00268-12 2012 Mar Broiler 18d Catalunya B-00286-12 2012 Mar Broiler 31d Navarra B-00332-12 2012 Mar Broiler B-00325-12 2012 Abr Broiler 17d genotipos de los adenovirus. y en la misma rama que los serotipos 2 y 11. Los otros 3 serotipo 8b -genotipo D- y serotipo 2 y 11 -genotipo E-. agruparon en el genotipo E, y en la misma rama que el probable es que los virus pertenezcan al serotipo 11, de referencia la mostraron con el adenovirus del serotipo 8b -96,9% y 96,8% respectivamente-, Las similitudes con el resto de serotipos de referencia fueron menores al renciarlos con seguridad del serotipo 2. Los resultados del 64,1% y 70,4% respectivamente. Por otro lado, estos su vez, realizar infecciones experimentales con virus serotipo 2 -96,6% y 93,7%. de ambos serotipos, 8b y 11, para determinar si existen Por lo tanto, en este estudio se han identificado dos diferencias en la patogenicidad de las cepas de ambos grupos de adenovirus involucrados en el brote de hepati- serotipos.

PATOLOGÍA

HEPATITIS POR CUERPOS DE INCLUSIÓN: BROTE EN ESPAÑA 2011-2012

Roser Dolz, Taiana Costa, Abdulahi Alfonso Morales y Natàlia Majó

Dirección de correspondencia: Campus de la UAB-CRESA, 08193, Bellaterra, Barcelona, España email: roser.dolz@cresa.uab.cat

Resumen. La hepatitis por cuerpos de inclusión -IBH- es una enfermedad vírica causada por adenovirus aviares del grupo 1, clasificados en 12 serotipos, caracterizándose por las principales lesiones observadas en el hígado. Afecta a pollos jóvenes, con morbilidad baja y una mortalidad que puede llegar hasta el 30 %.

Hasta el 2011 en España sólo se habían producido casos de IBH de forma esporádica pero en la primavera del mismo se detectó un brote en varias regiones, afectando a lotes de broilers y pollitas hasta de 7 días de edad. En el CReSA se ha puesto a punto una técnica de genotipado que ha permitido identificar dos grupos de adenovirus involucrados en el brote.

Hepatitis por cuerpos de inclusión. Imagen macroscópica del hígado afectado.

SELECCIONES AVÍCOLAS • OCTUBRE 2012 • Pág. 9

HEPATITIS POR CUERPOS DE INCLUSIÓN: BROTE EN ESPAÑA 2011-2012

La hepatitis por cuerpos de inclusión -IBH, siglas en

 

Tabla 1. Clasificación actual del género Aviadenovirus.

inglés- se trata de una enfermedad vírica causada por

 

 

 

adenovirus aviares del grupo 1 -Familia Adenoviridae;

 

 

 

género Aviadenovirus-. Clásicamente, los virus de este

 

 

 

género se han clasificado en 12 serotipos mediante

 

 

 

técnicas de seroneutralización en cultivos celulares

 

 

 

primarios. Como los virus de referencia utilizados en

 

 

 

estas técnicas en Europa y EE.UU. fueron distintos, se

 

 

 

llegó a una clasificación distinta entre ambas regiones.

 

 

 

Para evitar discrepancias, el comité de taxonomía vírica

 

 

 

unificó ambas clasificaciones. A su vez, la incorporación

 

 

 

de las técnicas moleculares ha permitido agrupar los 12

 

 

 

serotipos en 5 genotipos según su relación genética

 

 

 

(Tabla 1).

 

 

 

Las principales lesiones se observan en el hígado.

 

 

 

Macroscópicamente éste aparece pálido, friable, au-

 

 

 

mentado de tamaño y con petequias y hemorragias en el

 

 

 

parénquima. Histopatológicamente, se observa hepatitis

 

 

 

necrotizante multifocal de con la presencia de cuerpos

 

 

 

de inclusión intranucleares en los hepatocitos, los cua-

 

 

 

les permiten el diagnóstico etiológico de la enfermedad.

 

 

 

En general, la IBH afecta broilers de entre 3 y 7 semanas

 

excreción se inicie a las 2-4 semanas de vida, cuando

de vida, aunque se han descrito brotes tempranos en

 

 

desaparece la inmunidad maternal. La transmisión ho-

aves de siete días y tardíos en aves de veinte semanas.

 

 

rizontal también es importante, siendo las heces la

La morbilidad es baja y la mortalidad, que causa un pico

 

 

principal vía de excreción.

a los 3-4 días, suele estar alrededor del 5%-10% aunque

 

 

 

 

puede alcanzar el 30%. La transmisión vertical es una

 

Recientemente, Australia experimentó un brote de

ruta importante de infección. Los pollitos infectados

 

 

IBH que se caracterizó por afectar aves de menos de 3

verticalmente pueden excretar virus en las heces desde

 

 

semanas de vida y mortalidades del 30%. A partir de las

el momento de nacer, pero lo más habitual es que la

 

 

muestras clínicas de varios casos, se aislaron adenovirus

 

 

 

 

de los serotipos 6, 7 y 8, pero todos ellos pertenecientes

 

 

 

al genotipo E. De forma similar, en Nueva

 

 

 

Zelanda se aislaron adenovirus de los seroti-

 

 

 

pos 1, 8 y 12, también pertenecientes al

 

 

 

genotipo E, pero diferentes a los aislados de

 

 

 

Australia.

 

 

 

En España, hasta el 2011, se habían pro-

 

 

 

ducido casos de IBH de forma esporádica y

 

 

 

aislada. Así, en nuestro laboratorio, se diag-

 

 

 

nosticaba mediante histopatología de uno a

 

 

 

3 casos anuales -Figura 1-. Pero en la prima-

 

 

 

vera de 2011, se inició un brote que afectó

 

 

 

explotaciones de distintas zonas geográficas

 

 

 

y empresas integradoras. Se produjeron casos

 

 

 

en broilers, y también en pollitas de recría de

 

 

 

reproductoras pesadas, y se observaron casos

 

 

 

a edades tan tempranas como los 7 días de

 

 

 

vida (Tabla 2).

 

 

 

Dada la evolución del brote, en el CReSA

Hepatitis por cuerpos de inclusión. Imagen microscópica de un corte histológico

se decidió poner a punto una técnica de

genotipado de estos virus. Esta técnica se

del hígado.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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HEPATITIS POR CUERPOS DE INCLUSIÓN: BROTE EN ESPAÑA 2011-2012

Fig. 1. Gráfico de la evolución de casos diagnosticados de he- patitis por cuerpos de inclu- sión entre 2003 y 2012 en el Servei de Diagnòstic Patològic Veterinari de la Universitat Autònoma de Barcelona.

basa en la amplificación y secuenciación parcial del gen

 

congelado se pudo llevar a cabo la técnica. Estos 7 casos

que codifica las proteínas hexones de la cápside del

 

incluían 5 casos de 2011 y 2 casos de 2012, así como

adenovirus aviar. Mediante esta caracterización mole-

 

5 casos en broilers y 2 casos en reproductoras pesadas

cular es posible determinar el genotipo y también estimar

 

de diferentes localizaciones geográficas.

el serotipo de los virus involucrados en los casos clínicos.

 

En todos los casos se obtuvo un fragmento de unos

Se incluyeron un total de 7 de los casos clínicos diagnos-

 

 

600 nucleótidos para la comparación molecular. El

ticados, dado que la amplificación a partir de tejidos en

 

 

análisis filogenético agrupó 4 -N-512/11; B-19/12;

formol no fue posible en la mayoría de los casos y por lo

 

 

B-1118/11; N-235/12- de los 7 virus en el genotipo D

tanto, sólo de aquellos en los se había guardado tejido

 

 

 

 

 

 

Tabla 2. Información epidemiológica de los casos diagnosticados de hepatitis por cuerpos de inclusión mediante histopatología en el Servei de Diagnòstic Patològic Veterinari de la Universitat Autònoma de Barcelona.

 

REFERENCIA

A Ñ O

 

TIPO AVE

EDAD

REGIÓN GEOGRÁFICA

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

B-00232-11

2011

Mar

Broiler

28d

Navarra

 

 

B-00595-11

2011

Jun

Broiler

16d

Catalunya

 

 

N-00259-11

2011

Jun

Broiler

12d

Catalunya

 

 

B-00651-11

2011

Jun

Broiler

19d

Navarra

 

 

B-00722-11

2011

Jul

 

 

 

 

Catalunya

 

 

N-00325-11

2011

Jul

Broiler

14d

Castilla León

 

 

B-00751-11

2011

Jul

Machos reproductores

9d

Navarra

 

 

B-00872-11

2011

Sep

Broiler

 

Valencia

 

 

B-00899-11

2011

Sep

 

 

 

 

Catalunya

 

 

B-00950-11

2011

Oct

Broiler

 

Valencia

 

 

B-00978-11

2011

Oct

Broiler

32d

Castilla León

 

 

N-00512-11

2011

Nov

Reproductora pesada

8d

Catalunya

 

 

B-01030-11

2011

Nov

Broiler

40d

Catalunya

 

 

B-01049-11

2011

Nov

Broiler

 

Catalunya

 

 

B-01118-11

2011

Nov

Broiler

14d

Castilla la Mancha

 

 

B-01141-11

2011

Dic

Broiler

14d

Galicia

 

 

B-01171-11

2011

Dic

Broiler

7d

Galicia

 

 

B-00019-12

2012

Ene

Machos reproductores

 

 

 

 

B-00074-12

2012

Ene

Broiler

22d

Catalunya

 

 

B-00097-12

2012

Ene

Broiler

18d

Aragón-Navarra

 

 

B-00202-12

2012

Feb

Broiler

4d

Catalunya

 

 

B-00235-12

2012

Mar

Broiler

25d

Catalunya

 

 

B-00268-12

2012

Mar

Broiler

18d

Catalunya

 

 

B-00286-12

2012

Mar

Broiler

31d

Navarra

 

 

B-00332-12

2012

Mar

Broiler

 

Andalucía

 

 

B-00325-12

2012

Abr

Broiler

17d

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

SELECCIONES AVÍCOLAS • OCTUBRE 2012 • Pág. 11

HEPATITIS POR CUERPOS DE INCLUSIÓN: BROTE EN ESPAÑA 2011-2012

Fig. 2. Árbol filogenético realizado a partir de las secuencias nucleotídicas del gen hexón del adenovirus aviar. En negrita los virus involu-crados en el brote de IBH en España. En colores, los serotipos de referencia pertenecientes a cada uno de los 5 genotipos de los adenovirus.

y en la misma rama que los serotipos 2 y 11. Los otros 3 virus españoles -B-595/11; B-950/11; B-235/12- se agruparon en el genotipo E, y en la misma rama que el serotipo 8b -Figura 2-. El análisis de las similitudes nucleotídicas y aminoacídicas mostró que los 3 virus agrupados en el genotipo E tenían un 100% de similitud nucleotídica y aminoacidica entre ellos, y la máxima similitud nucleotídica y aminoacídica con los adenovirus de referencia la mostraron con el adenovirus del serotipo 8b -96,9% y 96,8% respectivamente-, Las similitudes con el resto de serotipos de referencia fueron menores al 85%. A su vez, la similitud nucleotídica y aminoacídica con los 4 virus españoles agrupados en el genotipo D fue del 64,1% y 70,4% respectivamente. Por otro lado, estos 4 virus españoles del genotipo D también fueron 100% idénticos entre ellos. Al compararlos con los serotipos de referencia mostraron máxima similitud nucleotídica y aminoacídica con el serotipo 11 -97,5% y 95,6%- y el serotipo 2 -96,6% y 93,7%.

Por lo tanto, en este estudio se han identificado dos grupos de adenovirus involucrados en el brote de hepati-

tis por cuerpos de inclusión en España en 2011 y 2012: serotipo 8b -genotipo D- y serotipo 2 y 11 -genotipo E-. En este último caso, hay que tener en cuenta que los serotipos 2 y 11, dan reacciones cruzadas en las técni- cas de serotipado clásicas, y teniendo en cuenta la elevada similitud genética entre ellos es probable que sean dos serotipos muy similares. Con lo cual lo más probable es que los virus pertenezcan al serotipo 11, con quien comparten más similitud, pero que debido a la relación entre ambos serotipos no nos permita dife- renciarlos con seguridad del serotipo 2. Los resultados obtenidos no nos permiten observar ninguna relación epidemiológica entre el serotipo de virus identificado y las características del caso clínico, probablemente de- bido al pequeño número de casos incluidos en este estudio. Por ello, sería interesante incluir más casos clínicos en el estudio de caracterización molecular, y a su vez, realizar infecciones experimentales con virus de ambos serotipos, 8b y 11, para determinar si existen diferencias en la patogenicidad de las cepas de ambos serotipos.

Pág.12 • SELECCIONES AVÍCOLAS • OCTUBRE 2012

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